• наследственная предрасположенность
• чрезмерное воздействие химических веществ (в том числе лекарственных средств) или повышенная чувствительность к ним;
• воздействие ядов (мышьяк, пчелиный, змеиный яды, грибы, свинец и др.);
• некоторые бактериальные или паразитарные инфекции (малярия, пищевые токсикоинфекции и др.);
• ожоги
• ДВС-синдром
• групповая несовместимость при переливании крови;
• злокачественные новообразования крови, лимфоидной ткани, костного мозга
• паранеопластический синдром
• хронический гломерулонефрит
• гепатиты
• беременность
• авитаминозы
• системные заболевания соединительной ткани
• механическое повреждение эритроцитов (например, искусственными клапанами сердца);
• дефицит витамина Е.
А. Мембранопатии вследствие нарушения структуры белка мембраны эритроцита:
1. Микросфероцитоз; эллиптоцитоз; стоматоцитоз; пиропойкилоцитоз
2. Нарушение липидов мембраны эритроцитов: акантоцитоз, дефицит активности лецитин-холестерин-ацилтрансферазы, увеличение содержания лецитина в мембране эритроцитов, детский инфантильный пикноцитоз
Б. Ферментопатии:
1. Дефицит ферментов пентозофосфатного цикла
2. Дефицит активности ферментов гликолиза
3. Дефицит активности ферментов обмена глутатиона
4. Дефицит активности ферментов, участвующих в использовании АТФ
5. Дефицит активности рибофосфатпирофосфаткиназы
6. Нарушение активности ферментов, участвующих в синтезе порфиринов
В. Гемоглобинопатии:
1. Обусловленные аномалией первичной структуры гемоглобина
2. Вызванные снижением синтеза полипептидных цепей, входящих в состав нормального гемоглобина
3. Обусловленные двойным гетерозиготным состоянием
4. Аномалии гемоглобина, не сопровождающиеся развитием заболевания
А. Иммунные гемолитические анемии:
1. Гемолитические анемии, связанные с воздействием антител: изоиммунные, гетероиммунные, трансиммунные
2. Аутоиммунные гемолитические анемии: с неполными тепловыми агглютининами, с тепловыми гемолизинами, с полными холодовыми агглютининами, связанные с двухфазными холодовыми гемолизинами
3. Аутоиммунные гемолитические анемии с антителами против антигена нормоцитов костного мозга
Б. Гемолитические анемии, связанные с изменением мембран, обусловленные соматической мутацией: ПНГ
В. Гемолитические анемии, связанные с механическим повреждением оболочки эритроцитов
Г. Гемолитические анемии, связанные с химическим повреждением эритроцитов (свинец, кислоты, яды, алкоголь)
Д. Гемолитические анемии на фоне дефицита витаминов Е и А
Е. Гемолитические анемии, обусловленные разрушением эритроцитов паразитами (малярия)
• гемоглобинемия – наличие свободного гемоглобина в крови вследствие активного разрушения эритроцитов;
• гемосидеринурия – наличие в моче гемосидерина – продукта окисления в почках избыточного гемоглобина;
• гемоглобинурия – наличие в моче неизмененного гемоглобина, признака крайне высокой скорости разрушения эритроцитов.
Подтверждение внутрисосудистого гемолиза осуществляется при помощи следующих лабораторных анализов:
• общий анализ крови – снижение количества эритроцитов и\или гемоглобина, увеличение количества ретикулоцитов, лейкоцитоз со сдвигом влево, повышение СОЭ
• биохимический анализ крови – увеличение общего билирубина за счет непрямой фракции, повышение сывороточного железа
• мазок периферической крови – при различных способах окраски и фиксации мазка определяется большинство аномалии строения эритроцита.
• Повышен уровень стеркобилина в кале и уробилина в моче.
Второй этап диагностики:
• Анализ жалоб больного: общее недомогание, слабость, желтушность кожных покровов и склер глаз, потемнение мочи и др.
• Анализ анамнеза заболевания (наличие гемолитической анемии у одного из родственников, факт химического отравления, наличие заболеваний крови или иммунной системы и др.).
• прямой и непрямой тест Кумбса;
• циркулирующие иммунные комплексы;
• осмотическая резистентность эритроцитов;
• исследование активности ферментов эритроцита (глюкоза-6-фосфатдегидрогназа (Г-6-ФДГ), пируваткиназа и др.);
• электрофорез гемоглобина;
• проба на серповидность эритроцитов;
• проба на тельца Гейнца;
• бактериологический посев крови;
• исследование «толстой капли» крови;
• миелограмма;
• проба Хема, проба Хартмана (сахарозная проба).
Прямой и непрямой тест Кумбса
Проба Кумбса — реакция на определение антител к эритроцитам (например, при резус-конфликте или при переливании несовместимой крови). Циркулирующие иммунные комплексы косвенно свидетельствуют об аутоиммунной природе гемолиза.
Осмотическая резистентность эритроцитов
Снижение осмотической резистентности эритроцитов чаще развивается при врожденных формах гемолитических анемий, таких как сфероцитоз, овалоцитоз и акантоцитоз. При талассемии, напротив, наблюдается увеличение осмотической резистентности эритроцитов.
Исследование активности ферментов эритроцитов
С данной целью сначала осуществляют качественные анализы на наличие или отсутствие искомых ферментов, а затем прибегают к количественным анализам, осуществляемым при помощи ПЦР (полимеразной цепной реакции). Количественное определение ферментов эритроцитов позволяет выявить их снижение по отношению к нормальным значениям и диагностировать скрытые формы эритроцитарных ферментопатий.
Электрофорез гемоглобина
Исследование осуществляется с целью исключения как качественных, так и количественных гемоглобинопатий (талассемий и серповидно-клеточной анемии).
Проба на серповидность эритроцитов
Сутью данного исследования является определение изменения формы эритроцитов по мере снижения парциального давления кислорода в крови. В случае если эритроциты принимают серповидную форму, то диагноз серповидно-клеточной анемии считается подтвержденным.
Проба на тельца Гейнца
Целью данной пробы является обнаружение в мазке крови специальных включений, являющихся нерастворимым гемоглобином. Данная проба осуществляется для подтверждения такой ферментопатии как дефицит Г-6-ФДГ. Однако нужно помнить, что тельца Гейнца могут появиться в мазке крови при передозировке сульфаниламидов или анилиновых красителей. Определение данных образований осуществляется в темнопольном микроскопе или в обычном световом микроскопе при специальном окрашивании.
Бактериологический посев крови
Бак-посев проводится с целью определения видов циркулирующих в крови инфекционных агентов, которые могут взаимодействовать с эритроцитами и вызывать их разрушение прямым путем или посредством иммунных механизмов.
Исследование «толстой капли» крови
Данное исследование проводится с целью выявления возбудителей малярии, жизненный цикл которых тесно сопряжен с разрушением эритроцитов.
Миелограмма
Миелограмма является результатом пункции костного мозга. Данный параклинический метод позволяет выявить такие патологии как злокачественные заболевания крови, которые посредством перекрестной иммунной атаки при паранеопластическом синдроме разрушают эритроциты. Помимо этого в пунктате костного мозга определяется разрастание эритроидного ростка, что свидетельствует о высоких темпах компенсаторной продукции эритроцитов в ответ на гемолиз.
Проба Хема. Проба Хартмана (сахарозная проба)
Обе пробы проводятся с целью определения длительности существования эритроцитов того или иного пациента. Для того чтобы ускорить процесс их разрушения, тестируемый образец крови помещают в слабый раствор кислоты или сахарозы, а затем оценивают процент разрушенных эритроцитов. Проба Хема считается положительной при разрушении более 5% эритроцитов. Проба Хартмана считается положительной, когда разрушается более 4% эритроцитов. Положительная проба свидетельствует о пароксизмальной ночной гемоглобинурии.
Помимо представленных лабораторных тестов для установления причины гемолитической анемии могут быть проведены другие дополнительные тесты и инструментальные исследования, назначаемые специалистом в области того заболевания, которое предположительно является причиной гемолиза.
• Ультразвуковое исследование органов брюшной полости для определения размеров печени и селезенки.
• Пункция костного мозга — исследование состояния кроветворной системы. В костном мозге наблюдается резко выраженная гиперплазия эритроидного ростка.
На этапе клинического анализа крови врач-лаборант изучает морфологию эритроцитов. При этом могут быть выявлены различные ее изменения: микро-, сферо-, овало-, эллипто-, стомато-, аканто-, пиропикноцитоз, мишеневидность эритроцитов, что дает основание предположить один из вариантов мембранопатии, а мишеневидность эритроцитов характерна для талассемии. При наличии в эритроцитах телец Гейнца-Эрлиха на фоне анизопойкилоцитоза можно предположить один из вариантов наследственной ферментопатии. При серповидноклеточной гемолитической анемии проводят метабисульфитную пробу или пробу с герметизацией капли крови, что позволяет увеличить число серповидных эритроцитов и тем самым облегчает диагностику. Внутрисосудистый гемолиз проявляется наличием фрагментированных эритроцитов, количество которых иногда достигает 100 %, что наблюдается при ДВС-синдроме, сопровождающем многие тяжелые заболевания, а также при отравлении гемолитическими ядами, маршевом гемолизе и при искусственном клапане сердца. Таким образом, измененная морфология эритроцитов, характерная для тех или иных вариантов гемолитической анемии, позволяет обосновать дальнейший диагностический поиск.